
體液病原DNA提取試劑盒采用核酸提取技術(shù),配合順磁性磁珠和特緩沖液系統(tǒng),操作過(guò)程安全便捷,能夠較大程度去除蛋白、脂質(zhì)及其他雜質(zhì)。
一般來(lái)說(shuō),核酸分離方法包括酚仿抽提法、凍融法、煮沸法和硅膠膜吸附、磁珠分離等,提取步驟中一般含有細(xì)胞裂解、沉淀,離心、漂洗、洗脫、溶解核酸等過(guò)程。目前在體液病毒DNA的提取過(guò)程中,一般采用硅膠膜吸附或磁珠分離法,經(jīng)常會(huì)用到蛋白酶k加熱消化、處理、含醇洗液漂洗、加熱洗脫等步驟,操作較為繁瑣,現(xiàn)有的一些試劑盒含有具有一些有毒物質(zhì),會(huì)損害人體健康。另外,受到洗脫液體積的影響,往往難以將回收到的dna全部用于檢測(cè),進(jìn)而影響了檢測(cè)靈敏度。
杭州體液病原DNA提取 迅速 便捷 操作過(guò)程安全便捷-南京兔牙生物科技有限公司
體液病原DNA提取試劑盒用于從各種液體樣品中提取DNA的試劑盒。可以處理各種液體樣品(血液,血清,血漿,腦脊液,淋巴液,細(xì)胞培養(yǎng)上清液等)、單個(gè)或少量的細(xì)胞等。提取的DNA與PCR、熒光PCR、RT-PCR、熒光RT-PCR等后續(xù)反應(yīng)兼容。
試劑盒特點(diǎn):
1.DNA的回收率高。
2.一管式操作,減少了樣品污染的可能。
3.一站式套裝,降低了實(shí)驗(yàn)誤差。
4.安全無(wú)毒,不需要使用一些溶液。
5.試劑穩(wěn)定,可以長(zhǎng)期放置。
體液病原DNA提取試劑盒結(jié)合在硅基質(zhì)膜或磁珠表面的DNA,經(jīng)含醇的鹽溶液漂洗可進(jìn)一步去除細(xì)胞殘片、非特異吸附的蛋白質(zhì)和過(guò)濃的鹽離子,再經(jīng)純水等洗脫液即可將純度較高的DNA洗脫下來(lái),進(jìn)而應(yīng)用于下游實(shí)驗(yàn)中(如pcr、酶切、連接、測(cè)序等);通過(guò)酚仿釋放至溶液中的核酸,可通過(guò)調(diào)節(jié)酸堿度后加入高濃度醇溶液沉淀出來(lái),再經(jīng)醇溶液洗滌晾干后即可獲得高純度DNA。
體液病原DNA提取試劑盒的操作步驟:
1、取1.5ml離心管(自備),加入20ul的Proteinase K溶液。
2、向離心管中加入200 ul血清或血漿,然后再加入200 ul BufferGB,渦旋震蕩15 sec。
3、56°C孵育15 min,短暫離心,將管壁上的溶液收集到管底。
4、加入250ul無(wú)水乙醇,渦旋震蕩15sec,室溫放置5 min,短暫離心,將管壁上的溶液收集到管底。
5、將一個(gè)Spin Columns CG“放入Collection Tubes(2 m1) 中,將上一步所得溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,10 000 rpm離心30 sec,棄收集管中的廢液。
6、向吸附柱內(nèi)加入500ul 的Buffer GD,室溫10 000 rpm離心30 sec,棄收集管中廢液。
7、向吸附柱內(nèi)加入500ul的Buffer PW,室溫10000rpm 離心30 sec,棄收集管中廢液。
8、向吸附柱中加入500ul 無(wú)水乙醇,10000 rpm離心30 sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
9、室溫12000rpm離心3min,甩干殘留液體。
10、將離心吸附柱置于一個(gè)新的1.5 ml塑料離心管中,小心打開(kāi)吸附柱的蓋子,室溫放置3 min,使吸附膜完全變干。加入30~ 100ul的洗脫液,室溫放置2~ 5 min。12000 rpm離心1min,離心管底溶液即DNA。
體液病原DNA提取試劑盒的產(chǎn)品特點(diǎn):
1、不需要使用試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。
2、節(jié)省時(shí)間,簡(jiǎn)捷,單個(gè)樣品操作一般可在幾十分鐘內(nèi)完成。
3、多次柱漂洗確保高純度,提取的病毒DNA純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,可適用于各種操作,包括PCR、酶切、雜交等。
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