外泌體研究常見問題解答91.外泌體的分離方法有哪些，哪種更好？分離是進(jìn)行外泌體研究關(guān)鍵的一步，只有選擇了合適的方法才能得到理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。分離方法包括：**速離心、尺寸排阻、*磁珠、聚合物沉淀、親和磁珠/膜等方法。根據(jù)外泌體的大小，密度和表面標(biāo)志物的不同進(jìn)行分離，不同提取外泌體方法優(yōu)劣勢比較，受限于篇幅，詳細(xì)版請聯(lián)系維思克思生物科技獲取。2.細(xì)胞培養(yǎng)上清中死細(xì)胞對外泌體分離的影響？在細(xì)胞凋亡/死亡過程中會釋放大量Evs，會混入活細(xì)胞分泌的外泌體中，而目前的外泌體分離方法并不能將兩者區(qū)分開來。所以在收集細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本時，需要保證細(xì)胞活率應(yīng)不小于95%。3.大體積的樣本類型，如何分離外泌體？大體積樣本，如細(xì)胞培養(yǎng)上清、尿液等，可以先濃縮樣本（如超濾或外泌體濃縮試劑等），減少樣本體積，再使用常規(guī)的外泌體分離方法。4.復(fù)雜的樣本類型，如何分離得到高純度的外泌體？復(fù)雜的樣本類型如血清、血漿、奶制品、腦脊液等，含有很多與外泌體在尺寸和密度接近的雜質(zhì)，常規(guī)的外泌體分離方法難以獲取高純度的外泌體，建議使用親和的外泌體分離方法，如PS親和、*親和、膜親和等外泌體分離試劑盒。外泌體研究工具規(guī)模化生產(chǎn)儲備，**供應(yīng)穩(wěn)定，應(yīng)對突發(fā)實(shí)驗(yàn)需求。玫瑰細(xì)胞外囊泡靶向

相信大家一直都被一個問題困擾，什么樣的外泌體才是好的外泌體呢？采購?fù)饷隗w時，如何判斷外泌體質(zhì)量？現(xiàn)在，我們對外泌體供應(yīng)商-維思克思的外泌體WSR0014-1進(jìn)行測評。咱們來看看高質(zhì)量的外泌體到底長什么樣？一、首先對外泌體進(jìn)行鑒定。首先要證明是外泌體，那如何證明呢？一般從三大基礎(chǔ)表征維度進(jìn)行分析：形態(tài)、粒徑分布、外泌體標(biāo)志蛋白。二、確定外泌體顆粒數(shù)與純度。還需另一重要表征維度外泌體的純度。在做實(shí)驗(yàn)時，怎樣考察純度呢？不同來源的外泌體，因獲取樣本的不一致，每種樣本中雜蛋白的含量不盡相同，同時分離方法也不一定相同，這可能導(dǎo)致不一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。外泌體純度表征可以用顆粒數(shù)/蛋白、顆粒數(shù)/RNA、蛋白/脂質(zhì)、脂質(zhì)/RNA等多個維度來評估外泌體純度，避免mian單一方法的局限性。備注：脂質(zhì)濃度用維思克思WSR0028-2測量；RNA濃度用維思克思WSR0039測量。三、評估外泌體的安全性。如果用來做細(xì)胞或動物實(shí)驗(yàn)，外泌體中含有影響細(xì)胞或動物的成分，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果將會令人非常詛喪。這次測評將外泌體的安全性指標(biāo)進(jìn)行的評估，包括內(nèi)外源病毒、細(xì)菌、支原體的檢測，結(jié)果顯示安全性指標(biāo)全部合格。科研用Extracellular Vesicles標(biāo)志物外泌體研究工具主要技術(shù)自主研發(fā)，持續(xù)迭代升級，提升研究價值。

外泌體研究常見問題解答22.外泌體形成的機(jī)制是什么？外泌體通常被描述為通過多囊泡體與質(zhì)膜融合產(chǎn)生的內(nèi)吞途徑的囊泡，通過多泡體分泌到細(xì)胞外的小囊泡。它們是細(xì)胞分泌的一個更大的囊泡家族的一部分，包括微泡、外泌體和脫落顆粒，這些囊泡（除外泌體外）來源于質(zhì)膜的直接出芽。由于這些實(shí)體的大小、密度和總體組成的相似性存在重疊，使用目前可用的技術(shù)和儀器將其分離是較具挑戰(zhàn)性的。3.外泌體和微囊泡的區(qū)別是什么？外泌體和微囊泡的區(qū)別在于其產(chǎn)生的方式不同。從晚期胞內(nèi)體分泌的細(xì)胞外囊泡稱為外泌體，從細(xì)胞膜直接出芽產(chǎn)生的細(xì)胞外囊泡稱為微囊泡。二者的大小也有所不同，外泌體的粒子直徑約40-100nm，微囊泡的粒子直徑約100-1000nm，但有報(bào)道發(fā)現(xiàn)也存在小直徑的微囊泡，所以無法從粒子大小來明確區(qū)分二者。4.外泌體是由什么組成的？外泌體是脂質(zhì)膜包裹的，含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、RNA和其他代謝物的微小囊泡（30–150nm）。外泌體的貨物和表面蛋白可能有很大差異，不同的細(xì)胞類型可以分泌不同的外泌體。

外泌體表征與定量難在什么地方？又該怎么做？我們拜訪過很多外泌體研究工作者，其中談到多的是外泌體難以分離，分離后的外泌體不好定量，定量的外泌體數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確等問題。2.單一表征方法的局限性對外泌體的純度表征目前采用的是外泌體陰性蛋白標(biāo)志、顆粒蛋白比。外泌體陰性蛋白標(biāo)志一般采用WB檢測，屬于定性檢測，與樣本處理、抗體、顯色、曝光時間等多個因素有關(guān)，如果作為純度表征的指標(biāo)，顯然是不合適的。在蛋白聚集體或其他雜質(zhì)（糖/脂質(zhì)/核酸等）聚集體/大顆粒較多時，顆粒蛋白比的數(shù)值也可能較大，其作為純度表征指標(biāo)也有其局限性。既然上述外泌體定量方法、表征方法具有其局限性，那么如何科學(xué)的對外泌體進(jìn)行定量和表征呢？外泌體研究工具簡化包裝方案，按需定制規(guī)格，降低包裝物料浪費(fèi)。

外泌體定量與表征的又一有效補(bǔ)充！外泌體脂質(zhì)脂質(zhì)定量試劑盒（比色法）外泌體由磷脂雙分子層包裹，包含脂質(zhì)等代謝物。目前外泌體缺乏有效的定量和表征方法，單一的檢測技術(shù)都有其局限性。維思克思的WSR0028可用于外泌體的脂質(zhì)定量，既可測定外泌體的脂質(zhì)含量，為脂質(zhì)研究提供有力工具，又能作為外泌體定量和表征方法的有效補(bǔ)充。現(xiàn)有的脂質(zhì)定量方法大都需要昂貴的儀器，例如HPLC儀器、光散射檢測技術(shù)等。本產(chǎn)品可替代這些儀器，實(shí)現(xiàn)小成本快速檢測！產(chǎn)品特點(diǎn)：靈敏度高，檢測脂質(zhì)濃度下限達(dá)到5μg/mL。操作簡便，需三步即可檢測出脂質(zhì)含量，整個操作時間不**過40min，節(jié)約時間。線性范圍廣，5-1000μg/mL濃度范圍內(nèi)有較好的線性范圍。產(chǎn)品信息：ExosomalLipidQuantificationKit(Colorimetric)（WSR0028）。外泌體研究工具全流程質(zhì)量管控，從生產(chǎn)到售后，**實(shí)驗(yàn)可靠性。科研用Extracellular Vesicles標(biāo)志物

外泌體研究工具大包裝經(jīng)濟(jì)方案，適合長期穩(wěn)定研究，平均成本更低。玫瑰細(xì)胞外囊泡靶向

外泌體研究常見問題解答105.外泌體研究，應(yīng)選用血漿還是血清？血清是血液凝固之后收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原，凝血因子，以及多了很多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。血漿=血液-血細(xì)胞血清=血漿-纖維蛋白原-凝血因子所以一般實(shí)驗(yàn)選擇血漿，在特殊情況下，如研究與血小板相關(guān)的疾病的時候，當(dāng)然是血清更適合。6.外泌體血液樣本提取需注意事項(xiàng)？全血在長時間放置，冷凍、離心等會發(fā)生溶血現(xiàn)象，此時不建議分離外泌體。7.細(xì)胞培養(yǎng)去除血清源外泌體？a.將細(xì)胞培養(yǎng)用的血清通過100000g**速離心10h，去除血清外泌體；b.選擇無血清培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。c.使用商業(yè)化的無外泌體胎牛血清（WSC0020）8.如何提取組織細(xì)胞外泌體？將組織剪成小塊，在無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)12h；轉(zhuǎn)移至離心管中，4℃3000g離心20min去除培養(yǎng)液中雜質(zhì)和細(xì)胞碎片，將上清液用0.45μm過濾，接著用0.2μm過濾，然后選擇合適的外泌體分離方法。玫瑰細(xì)胞外囊泡靶向

維思克思生物科技(武漢)有限公司是一家有著**的發(fā)展理念，**的管理經(jīng)驗(yàn)，在發(fā)展過程中不斷完善自己，要求自己，不斷創(chuàng)新，時刻準(zhǔn)備著迎接更多挑戰(zhàn)的活力公司，在湖北省等地區(qū)的機(jī)械及行業(yè)設(shè)備中匯聚了大量的人脈以及客戶資源，在業(yè)界也收獲了很多良好的評價，這些都源自于自身的努力和大家共同進(jìn)步的結(jié)果，這些評價對我們而言是較好的前進(jìn)動力，也促使我們在以后的道路上保持奮發(fā)圖強(qiáng)、一往無前的進(jìn)取創(chuàng)新精神，努力把公司發(fā)展戰(zhàn)略推向一個新高度，在全體員工共同努力之下，全力拼搏將共同維思克思生物科技供應(yīng)和您一起攜手走向更好的未來，創(chuàng)造更有價值的產(chǎn)品，我們將以更好的狀態(tài)，更認(rèn)真的態(tài)度，更飽滿的精力去創(chuàng)造，去拼搏，去努力，讓我們一起更好更快的成長！

維思克思生物科技（武漢）有限公司（以下簡稱“公司”）是一家專注建設(shè)工業(yè)級外泌體生產(chǎn)制造平臺的**企業(yè)，以外泌體為主，開發(fā)新一代外泌體創(chuàng)新藥物及再生醫(yī)學(xué)產(chǎn)品。

公司總部位于風(fēng)景秀麗的中國武漢光谷生物城，并在陜西西安設(shè)有西北大學(xué)聯(lián)合研發(fā)中心。公司已發(fā)表二十余篇高水平研究論文及十余項(xiàng)發(fā)明**和軟件著作權(quán)，并**國家**企業(yè)、國家科技型中小企業(yè)、湖北省創(chuàng)新型中小企業(yè)、武漢市“光谷3551人才計(jì)劃”企業(yè)等多項(xiàng)榮譽(yù)資質(zhì)，技術(shù)和研發(fā)實(shí)力雄厚。
公司創(chuàng)始團(tuán)隊(duì)由國內(nèi)比較早的一批開展外泌體基礎(chǔ)研究的科學(xué)家、經(jīng)驗(yàn)豐富的藥物研發(fā)及工藝開發(fā)技術(shù)人員，以及商業(yè)化人士組建而成。經(jīng)過十余年研究積累，目前已構(gòu)建技術(shù)研發(fā)、生產(chǎn)制造、產(chǎn)品開發(fā)、新藥開發(fā)的完整技術(shù)鏈條，具備穩(wěn)定、多樣的外泌體工程化改造體系及工業(yè)級外泌體生產(chǎn)體系。同時，開發(fā)的外泌體高產(chǎn)無血清培養(yǎng)基及*分離介質(zhì)，能提升外泌體產(chǎn)量及純化效率，降低生產(chǎn)成本，推動外泌體在醫(yī)藥、醫(yī)療、醫(yī)美等領(lǐng)域的產(chǎn)業(yè)應(yīng)用。