外泌體研究常見問題解答72.哪些標(biāo)記物可用于外泌體表征？檢測(cè)膜結(jié)合或膜相關(guān)蛋白，以驗(yàn)證膜的存在。許多外泌體中發(fā)現(xiàn)了CD63、CD81和CD9等。然而檢測(cè)到至少2種不同細(xì)胞系釋放CD9陰性的外泌體（Jurkat和幾種B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞）。通常檢測(cè)CD9、CD81和CD63以驗(yàn)證我們的制劑中是否存在膜。同樣重要的是需要確定來自細(xì)胞器的污染囊泡水平：ER：熱休克蛋白90B1，鈣內(nèi)；高爾基：GM130；線粒體：細(xì)胞色素C；細(xì)胞核：組蛋白。外泌體分子組成因細(xì)胞來源而異。雖然這些單個(gè)分子類別的測(cè)量可用于估計(jì)外泌體豐度，但這些值不一定與外泌體濃度完全相關(guān)，也不存在跨EV源樣本的普遍性；因此，不應(yīng)將其作為的外泌體濃度測(cè)量方法。不同原理外泌體表征方法的測(cè)量值不太可能有相同偏差；例如，光學(xué)與非光學(xué)方法測(cè)量的外泌體直徑。由于許多外泌體表征方法不是特異性的，就是無法檢測(cè)所有的外泌體。植物和中草藥囊泡目前公認(rèn)的特異性蛋白標(biāo)志物，據(jù)多篇文獻(xiàn)報(bào)道TET-8很可能是植物囊泡的潛在蛋白標(biāo)志物。細(xì)菌的特異性蛋白標(biāo)志物，脂多糖（革蘭氏陰性菌）、脂胞壁酸質(zhì)（革蘭氏陽性菌）和分枝桿菌脂質(zhì)。外泌體研究工具完備驗(yàn)證數(shù)據(jù)，提供詳細(xì)技術(shù)文檔，減少方法驗(yàn)證時(shí)間。血漿EVs代工

外泌體定量與表征的又一有效補(bǔ)充！外泌體脂質(zhì)脂質(zhì)定量試劑盒（比色法）外泌體由磷脂雙分子層包裹，包含脂質(zhì)等代謝物。目前外泌體缺乏有效的定量和表征方法，單一的檢測(cè)技術(shù)都有其局限性。維思克思的WSR0028可用于外泌體的脂質(zhì)定量，既可測(cè)定外泌體的脂質(zhì)含量，為脂質(zhì)研究提供有力工具，又能作為外泌體定量和表征方法的有效補(bǔ)充。現(xiàn)有的脂質(zhì)定量方法大都需要昂貴的儀器，例如HPLC儀器、光散射檢測(cè)技術(shù)等。本產(chǎn)品可替代這些儀器，實(shí)現(xiàn)小成本快速檢測(cè)！產(chǎn)品特點(diǎn)：靈敏度高，檢測(cè)脂質(zhì)濃度下限達(dá)到5μg/mL。操作簡(jiǎn)便，需三步即可檢測(cè)出脂質(zhì)含量，整個(gè)操作時(shí)間不**過40min，節(jié)約時(shí)間。線性范圍廣，5-1000μg/mL濃度范圍內(nèi)有較好的線性范圍。產(chǎn)品信息：ExosomalLipidQuantificationKit(Colorimetric)（WSR0028）。高通量胞外囊泡源頭工廠外泌體研究工具主要技術(shù)自主研發(fā)，持續(xù)迭代升級(jí)，提升研究?jī)r(jià)值。

維思克思的外泌體濃縮方案-超濾管02超濾管超濾。超濾濃縮是一種常用的分離技術(shù)，利用超濾膜對(duì)組分進(jìn)行分離。溶液通過超濾膜，利用膜孔的大小選擇性，將分子量較大的物質(zhì)過濾出來，而將分子量較小的物質(zhì)通過膜孔。本產(chǎn)品基于低蛋白吸附的過濾膜，根據(jù)膜的大小規(guī)格以達(dá)到樣本濃縮或分離的效果。具有操作簡(jiǎn)單，離心時(shí)間短，回收率高等特點(diǎn)。可用于生物樣品濃縮，分離，蛋白除雜等領(lǐng)域。使用方法：1.樣本澄清通過膜過濾樣本，使樣本澄清，去除雜質(zhì)。2.超濾管平衡超濾管中加入適量PBS，在轉(zhuǎn)子中離心。移去裝置底部PBS。3.樣品超濾向超濾管中加入5ml樣品，離心。棄除收集管中液體，回收濃縮樣品。

外泌體研究常見問題解答122.做外泌體研究，需要多少量的蛋白質(zhì)？不建議過多關(guān)注蛋白質(zhì)濃度，我們的經(jīng)驗(yàn)，蛋白質(zhì)測(cè)量與制劑中外泌體的數(shù)量之間幾乎沒有相關(guān)性。蛋白量不應(yīng)作為制劑中外泌體數(shù)量的估計(jì)。外泌體與蛋白量并不總是一個(gè)很好的相關(guān)性。我們主要使用細(xì)胞培養(yǎng)基和尿液作為起始樣本，即使在這種“簡(jiǎn)單”的溶液中（至少與血漿/血清相比），相關(guān)性也不是很好。這就是為什么我們開始關(guān)注細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)條件，并標(biāo)準(zhǔn)化外泌體收獲條件，以便在正確的時(shí)間收獲并提高系統(tǒng)的可重復(fù)性。血漿和血清中蛋白質(zhì)濃度和外泌體含量之間的相關(guān)性會(huì)更小。許多研究人員使用納米顆粒跟蹤分析（NTA）來測(cè)量囊泡的數(shù)量和大小分布，但這種方法不能提供相同大小范圍內(nèi)任何污染囊泡的信息。因此，電子顯微鏡應(yīng)始終與這種方法相結(jié)合。檢查污染囊泡存在的一種方法可能是進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡以檢測(cè)蛋白質(zhì)，如gp96，一種ER相關(guān)蛋白。3.外泌體WB鑒定時(shí)，選擇哪個(gè)內(nèi)參蛋白？無內(nèi)參蛋白。外泌體包裹的蛋白具有隨機(jī)性，同時(shí)不同細(xì)胞分泌的外泌體具有異質(zhì)性，所以外泌體中沒有哪種蛋白含量是恒定的，也就沒有所謂的內(nèi)參蛋白了。目前的外泌體WB鑒定，只能用于定性檢測(cè)。外泌體研究工具區(qū)域化倉(cāng)儲(chǔ)配送，縮短到貨時(shí)間，**實(shí)驗(yàn)連續(xù)性。

外泌體研究常見問題解答145.外泌體RT-qPCR實(shí)驗(yàn)是選擇哪個(gè)靶標(biāo)作為內(nèi)參？外泌體沒有公認(rèn)內(nèi)參，理由如上。常規(guī)內(nèi)參基因在外泌體中表達(dá)量甚至可能比目標(biāo)基因還低。外參是在沒有合適內(nèi)參的情況下的替代物。miRNA檢測(cè)外參是化學(xué)合成的線蟲短片段單鏈RNA(cel-miR-39-3p)在人、小鼠、大鼠中均無同源片段，比較大限度降低了對(duì)定量實(shí)驗(yàn)造成的干擾。6.外泌體SmallRNA-seq實(shí)驗(yàn)，樣本量有什么要求？**細(xì)胞系**使用40mL以上的初始樣品量。某些細(xì)胞（如懸浮細(xì)胞、干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等）中外泌體含量比較低，建議使用100mL的初始樣品量。一般需提取到10ng以上的TotalRNA，才可以用于SmallRNA-seq實(shí)驗(yàn)。7.如何確保外泌體RT-qPCR和SmallRNA-seq實(shí)驗(yàn)的成功率？為了**轉(zhuǎn)錄組實(shí)驗(yàn)的成功率，建議對(duì)提取的外泌體RNA進(jìn)行質(zhì)控，確保RNA質(zhì)量。如檢測(cè)RNA的濃度、純度和片段分布等，但由于外泌體RNA含量較低，建議使用商業(yè)的外泌體RNA質(zhì)控試劑盒對(duì)RNA質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估。外泌體研究工具穩(wěn)定批次生產(chǎn)，確保實(shí)驗(yàn)重復(fù)性，降低結(jié)果波動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)。血漿EVs代工

外泌體研究工具批量采購(gòu)優(yōu)惠政策，階梯式價(jià)格體系，量大成本更優(yōu)。血漿EVs代工

氯仿買不到？維思克思包有的Trizol法提取RNA是生物實(shí)驗(yàn)中常用的RNA提取方法，然而使用該方法也伴隨著不少困擾。比如，氯仿屬于管制試劑，難以購(gòu)買！比如，氯仿屬于劇毒試劑，使用時(shí)氣味十分難聞！如果你也遇到以上問題，為什么不選擇一款更安全、更環(huán)保、使用效果和氯仿相同的氯仿替代物呢？產(chǎn)品特點(diǎn)：安全環(huán)保，購(gòu)買方便；傳統(tǒng)抽提試劑氯仿屬于危險(xiǎn)化學(xué)品，可引起急性中毒以及致。本產(chǎn)品與氯仿相比毒性更小，更安全、環(huán)保；分層效果明顯，本產(chǎn)品有更強(qiáng)的疏水性，水相分層更為明顯，易于吸取，手殘黨友好；RNA質(zhì)量和得率無差別，提取出的RNA得率及質(zhì)量與氯仿提取出的五明顯差異，可完全替代氯仿；用量小，一瓶更耐用，相較于氯仿，本品抽提RNA時(shí)，操作步驟相同，但用量為氯仿的一半，更耐用；適用范圍廣，可適用于各種動(dòng)植物細(xì)胞、組織以及微生物樣本的RNA提取。產(chǎn)品信息：RNAExtractionAgent（WZ13）。血漿EVs代工

維思克思生物科技(武漢)有限公司匯集了大量的優(yōu)秀人才，集企業(yè)奇思，創(chuàng)經(jīng)濟(jì)奇跡，一群有夢(mèng)想有朝氣的團(tuán)隊(duì)不斷在前進(jìn)的道路上開創(chuàng)新天地，繪畫新藍(lán)圖，在湖北省等地區(qū)的機(jī)械及行業(yè)設(shè)備中始終保持良好的信譽(yù)，信奉著“爭(zhēng)取每一個(gè)客戶不容易，失去每一個(gè)用戶很簡(jiǎn)單”的理念，市場(chǎng)是企業(yè)的方向，質(zhì)量是企業(yè)的生命，在公司有效方針的**下，全體上下，團(tuán)結(jié)一致，共同進(jìn)退，齊心協(xié)力把各方面工作做得更好，努力開創(chuàng)工作的新局面，公司的新高度，未來維思克思生物科技供應(yīng)和您一起奔向更美好的未來，即使現(xiàn)在有一點(diǎn)小小的成績(jī)，也不足以驕傲，過去的種種都已成為昨日我們只有總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，才能繼續(xù)上路，讓我們一起點(diǎn)燃新的希望，放飛新的夢(mèng)想！

維思克思生物科技（武漢）有限公司（以下簡(jiǎn)稱“公司”）是一家專注建設(shè)工業(yè)級(jí)外泌體生產(chǎn)制造平臺(tái)的**企業(yè)，以外泌體為主，開發(fā)新一代外泌體創(chuàng)新藥物及再生醫(yī)學(xué)產(chǎn)品。

公司總部位于風(fēng)景秀麗的中國(guó)武漢光谷生物城，并在陜西西安設(shè)有西北大學(xué)聯(lián)合研發(fā)中心。公司已發(fā)表二十余篇高水平研究論文及十余項(xiàng)發(fā)明**和軟件著作權(quán)，并**國(guó)家**企業(yè)、國(guó)家科技型中小企業(yè)、湖北省創(chuàng)新型中小企業(yè)、武漢市“光谷3551人才計(jì)劃”企業(yè)等多項(xiàng)榮譽(yù)資質(zhì)，技術(shù)和研發(fā)實(shí)力雄厚。
公司創(chuàng)始團(tuán)隊(duì)由國(guó)內(nèi)比較早的一批開展外泌體基礎(chǔ)研究的科學(xué)家、經(jīng)驗(yàn)豐富的藥物研發(fā)及工藝開發(fā)技術(shù)人員，以及商業(yè)化人士組建而成。經(jīng)過十余年研究積累，目前已構(gòu)建技術(shù)研發(fā)、生產(chǎn)制造、產(chǎn)品開發(fā)、新藥開發(fā)的完整技術(shù)鏈條，具備穩(wěn)定、多樣的外泌體工程化改造體系及工業(yè)級(jí)外泌體生產(chǎn)體系。同時(shí)，開發(fā)的外泌體高產(chǎn)無血清培養(yǎng)基及*分離介質(zhì)，能提升外泌體產(chǎn)量及純化效率，降低生產(chǎn)成本，推動(dòng)外泌體在醫(yī)藥、醫(yī)療、醫(yī)美等領(lǐng)域的產(chǎn)業(yè)應(yīng)用。