你分離的血清/血漿外泌體真的干凈嗎？對于血清和血漿等復雜樣本，分離外泌體是十分棘手的。主要原因是血液樣本的成分比較復雜，很容易造成細胞外囊泡的污染。脂蛋白顆粒就是常見細胞外囊泡難以分離的污染物之一。外泌體與脂蛋白的體積、密度十分相近，以至于很多傳統的方法都不能把他們完全分離。1.密度梯度**速離心高密度脂蛋白的密度與細胞外囊泡密度相近，所以它是密度梯度離心主要的污染脂蛋白。低密度脂蛋白雖密度低于EV，但離心的方法還不足以完全將二者分開。因此使用密度梯度**速離心的方式可能無法完全排除脂蛋白污染的可能性。2.分子排阻法（SEC）SEC是根據粒徑大小進行外泌體分離。脂蛋白與外泌體尺寸相近，尤其是較低密度脂蛋白與乳糜微粒。因此，也無法通過分子排阻法將脂蛋白與細胞外囊泡完全分離。3.**速離心法在粒徑和密度相差不大的情況下，顆粒的沉降速度也相差不大。尤其是脂蛋白顆粒數遠**于外泌體時，被稱為金標準的**離法也稍顯不足了。基于此，維思克思**選擇磁珠法（WSR0002-2），是基于自主研發的均相液體磁珠，可特異性捕獲外泌體而不吸附雜質，實現高純度外泌體分離。外泌體研究工具復溶后穩定性強，多次使用不影響效果，減少浪費。何首烏EVs廠家供應

氯仿買不到？維思克思包有的Trizol法提取RNA是生物實驗中常用的RNA提取方法，然而使用該方法也伴隨著不少困擾。比如，氯仿屬于管制試劑，難以購買！比如，氯仿屬于劇毒試劑，使用時氣味十分難聞！如果你也遇到以上問題，為什么不選擇一款更安全、更環保、使用效果和氯仿相同的氯仿替代物呢？產品特點：安全環保，購買方便；傳統抽提試劑氯仿屬于危險化學品，可引起急性中毒以及致。本產品與氯仿相比毒性更小，更安全、環保；分層效果明顯，本產品有更強的疏水性，水相分層更為明顯，易于吸取，手殘黨友好；RNA質量和得率無差別，提取出的RNA得率及質量與氯仿提取出的五明顯差異，可完全替代氯仿；用量小，一瓶更耐用，相較于氯仿，本品抽提RNA時，操作步驟相同，但用量為氯仿的一半，更耐用；適用范圍廣，可適用于各種動植物細胞、組織以及微生物樣本的RNA提取。產品信息：RNAExtractionAgent（WZ13）。中藥細胞外囊泡OEM外泌體研究工具原料溯源體系完善，**產品質量可追溯，降低風險。

外泌體研究常見問題解答61.如何鑒定提取出來的外泌體？根據MISEV2023，鑒定外泌體首先需要通過WB來鑒定細胞外囊泡的標志蛋白是否存在于樣品中，通過電子顯微鏡來觀察樣品中細胞外囊泡的形態特征，通過NTA等手段來分析樣品中細胞外囊泡的群體特征（粒子濃度、直徑分布等）。一般從外泌體形態、外泌體粒徑和外泌體標志物來鑒定。（1）鑒定外泌體形態：通常使用透射電鏡檢測（TEM）；（2）鑒定外泌體粒徑（大小）和濃度：可以使用納米顆粒跟蹤分析（NTA）、納米流式、納米庫爾特粒度儀檢測；（3）鑒定動物細胞外泌體標志物：通常使用WB檢測外泌體標志蛋白（CD63、CD9、CD81、TSG101、Alix等），按**細胞外囊泡協會的建議為檢測3個陽性（一般選擇2個表面標志，1個內部標志）和1個陰性指標（Calnexin或GM130）。

EVs研究中，通常EVs來源，純化方法，定量技術，給藥對象等這些因素都會導致給藥劑量的差異。因此建立一個完善給藥劑量系統就顯得尤為重要。確定EVs有效劑量建議分為兩個方向，一個是長期層面；一個是短期層面。長期上需要眾多EVs從業者，制定有效的、適用于不同來源、不同生產工藝、不同純化方法的EVs量化或表征方法，這個層面無法短期內實現。在短期內，比較好購買商品化EVs，或者自己確定固定來源和生產工藝、定量方法的EVs，然后做細胞或動物的量效實驗時，做梯度稀釋的量效實驗，以確定比較好的給藥劑量，此方法可以。為盡快解決問題，達到預期實驗效果，只能從短期層面考慮。維思克思在外泌體行業深耕近十年，總結出EVs劑量的方案：選用維思克思MSC/HEK293/NK/植物外泌體標準品可縮短時間，提高實驗效率。外泌體標準品的來源、生產工藝、純化方法等都為固定的，外泌體標準品需試驗確定一次劑量即可，后續實驗都可使用統一劑量。該種方法更為簡便易得且節約時間。除商業化外泌體以外，同時還配套了外泌體研究相關產品，包括但不**于細胞培養基、外泌體分離、提取試劑盒、外泌體示蹤試劑盒等產品。外泌體研究工具定制化檢測方案，準確匹配研究需求，避免功能浪費。

外泌體研究常見問題解答91.外泌體的分離方法有哪些，哪種更好？分離是進行外泌體研究關鍵的一步，只有選擇了合適的方法才能得到理想的實驗結果。分離方法包括：**速離心、尺寸排阻、*磁珠、聚合物沉淀、親和磁珠/膜等方法。根據外泌體的大小，密度和表面標志物的不同進行分離，不同提取外泌體方法優劣勢比較，受限于篇幅，詳細版請聯系維思克思生物科技獲取。2.細胞培養上清中死細胞對外泌體分離的影響？在細胞凋亡/死亡過程中會釋放大量Evs，會混入活細胞分泌的外泌體中，而目前的外泌體分離方法并不能將兩者區分開來。所以在收集細胞培養上清樣本時，需要**細胞活率應不小于95%。3.大體積的樣本類型，如何分離外泌體？大體積樣本，如細胞培養上清、尿液等，可以先濃縮樣本（如超濾或外泌體濃縮試劑等），減少樣本體積，再使用常規的外泌體分離方法。4.復雜的樣本類型，如何分離得到高純度的外泌體？復雜的樣本類型如血清、血漿、奶制品、腦脊液等，含有很多與外泌體在尺寸和密度接近的雜質，常規的外泌體分離方法難以獲取高純度的外泌體，建議使用親和的外泌體分離方法，如PS親和、*親和、膜親和等外泌體分離試劑盒。外泌體研究工具批量采購優惠政策，階梯式價格體系，量大成本更優。何首烏EVs廠家供應

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外泌體研究常見問題解答119.在分離過程中，外泌體含量會發生變化嗎？準備的步驟越少，結果越好。很明顯，即使你是一個非常熟練的操作員，將**離作為預富集步驟也會導致囊泡的損失。因此，即使囊泡的純度很高，也無法控制哪些囊泡在處理過程中的丟失。10.為什么沉淀法或**速離心法提取的外泌體看不到沉淀？這種問題通常有三種可能性：1）使用的樣本體積太小或外泌體含量太低。2）使用了不透明的**速離心管，一般來說外泌體產量都比較小，不透明管底很難見到明顯沉淀的，可以當作有沉淀，繼續往后操作即可。3）使用了粘附性低的耗材。部分角轉管壁粘附性很低，沉淀很難富集或沉淀很容易滑落，請圓底離心管離心。11.外泌體和微囊泡可以分開提取嗎？外泌體和微囊泡無法明確區分二者，所以無法完全分開。維思克思**使用下列簡便方法：提取外泌體等粒子直徑小的細胞外囊泡時，請選用10000g離心后的上清樣品；提取含微囊泡在內的大粒子直徑的細胞外囊泡時，首先要回收1200g離心的上清，然后將其10,000g離心分離獲得的沉淀用PBS懸浮后作為樣品使用。同時提取上述兩種細胞外囊泡，請使用1200g離心分離的上清作為樣品。何首烏EVs廠家供應

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維思克思生物科技（武漢）有限公司（以下簡稱“公司”）是一家專注建設工業級外泌體生產制造平臺的**企業，以外泌體為主，開發新一代外泌體創新藥物及再生醫學產品。

公司總部位于風景秀麗的中國武漢光谷生物城，并在陜西西安設有西北大學聯合研發中心。公司已發表二十余篇高水平研究論文及十余項發明**和軟件著作權，并**國家**企業、國家科技型中小企業、湖北省創新型中小企業、武漢市“光谷3551人才計劃”企業等多項榮譽資質，技術和研發實力雄厚。
公司創始團隊由國內比較早的一批開展外泌體基礎研究的科學家、經驗豐富的藥物研發及工藝開發技術人員，以及商業化人士組建而成。經過十余年研究積累，目前已構建技術研發、生產制造、產品開發、新藥開發的完整技術鏈條，具備穩定、多樣的外泌體工程化改造體系及工業級外泌體生產體系。同時，開發的外泌體高產無血清培養基及*分離介質，能提升外泌體產量及純化效率，降低生產成本，推動外泌體在醫藥、醫療、醫美等領域的產業應用。