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    乳酸酶聯(lián)*試劑盒現(xiàn)貨_牛睪酮酶聯(lián)*試劑盒說明書

  • 作者:上海雙贏生物科技有限公司 2016-03-23 10:23 8770
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    乳酸酶聯(lián)*試劑盒現(xiàn)貨_牛睪酮酶聯(lián)*試劑盒說明書
    雞甲狀腺素(T4)酶聯(lián)*試劑盒使用目的:
    本試劑盒用于測(cè)定雞血清、血漿及相關(guān)液體樣本中甲狀腺素(T4)含量。
    實(shí)驗(yàn)原理
    雞甲狀腺素(T4)酶聯(lián)*試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中雞甲狀腺素(T4)水平。用純化的雞甲狀腺素(T4)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入甲狀腺素(T4),再與HRP標(biāo)記的甲狀腺素(T4)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成較終的黃色。顏色的深淺和樣品中的甲狀腺素(T4)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中雞甲狀腺素(T4)濃度。
    雞甲狀腺素(T4)酶聯(lián)*試劑盒組成
    130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶
    2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(160μg/L)0.5ml×1瓶
    3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶
    4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份
    5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張
    6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)
    標(biāo)本要求
    1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
    2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
    雞甲狀腺素(T4)酶聯(lián)*試劑盒操作步驟
    1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
    80μg/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
    40μg/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
    20μg/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
    10μg/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
    5μg/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
    2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
    待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,
    然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品較終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡
    量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
    3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
    4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
    重復(fù)5次,拍干。
    6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
    7.溫育:操作同3。
    8.洗滌:操作同5。
    9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
    11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
    計(jì)算
    以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
    雞甲狀腺素(T4)酶聯(lián)*試劑盒注意事項(xiàng)
    1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
    2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
    3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間較好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,**使用排槍加樣。
    4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,較好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6.底物請(qǐng)避光保存。
    7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
    9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
    雞甲狀腺素(T4)酶聯(lián)*試劑盒保存條件及有效期
    1.試劑盒保存:2-8℃。
    2.有效期:6個(gè)月
    上海雙贏生物科技有限公司ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)原理
    ???(1).?抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
    ???(2).?結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其*學(xué)活性。
    ???(3).?酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其*學(xué)活性,又保留酶的活性。
    ???(4).?受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
    ???(5).?此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
    ???(6).?加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以*學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)
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      (2)、規(guī)范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
      (3)、**的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
      (4)、適用范圍——適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
      (5)、可檢測(cè)指標(biāo)齊全——生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等
    
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