化學(xué)法生產(chǎn)還有一個不容忽視的成本問題：生產(chǎn)過程中使用堿性催化劑要求原料必須是毛油，比如未經(jīng)提煉的菜籽油和豆油，原料成本就占總成本的75%。因此采用廉價原料及提高轉(zhuǎn)化從而降低成本是生物能否實用化的關(guān)鍵，因此美國己開始通過基因工程方法研究高油含量的植物（見下文“工程微藻”法），日本采用工業(yè)廢油和廢煎炸油，歐洲是在不適合種植糧食的土地上種植富油脂的農(nóng)作物。
 生物的生物酶合成法
為解決上述問題，人們開始研究用生物酶法合成生物，即用動物油脂和低碳醇通過脂肪酶進(jìn)行轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)，制備相應(yīng)的脂肪酸及乙酯。酶法合成生物具有條件溫和、醇用量小、無污染排放的優(yōu)點(diǎn)。2001年日本采用固定化Rhizopus oryzae細(xì)胞生產(chǎn)生物，轉(zhuǎn)化率在80％左右，微生物細(xì)胞可連續(xù)使用430小時。
生物的生物酶合成法
為解決上述問題，人們開始研究用生物酶法合成生物，即用動物油脂和低碳醇通過脂肪酶進(jìn)行轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)，制備相應(yīng)的脂肪酸及乙酯。酶法合成生物具有條件溫和、醇用量小、無污染排放的優(yōu)點(diǎn)。2001年日本采用固定化Rhizopus oryzae細(xì)胞生產(chǎn)生物，轉(zhuǎn)化率在80％左右，微生物細(xì)胞可連續(xù)使用430小時。
2005年6月4日，《中國環(huán)境報》報道：清華大學(xué)生物酶法制生物中試成功，采用新工藝在中試裝置上生物產(chǎn)率達(dá)90％以上。中試產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)符合美國及德國的生物標(biāo)準(zhǔn)，并滿足我國0號優(yōu)等標(biāo)準(zhǔn)。中試產(chǎn)品經(jīng)發(fā)動機(jī)臺架對比試驗表明，與市售石化相比，采用含20％生物的混配作燃料，發(fā)動機(jī)排放尾氣中、碳化合物、煙度等主要有毒成分的濃度顯著下降，發(fā)動機(jī)動力特性等基本不變。
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